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抗体偶联药物(ADC)纯化选择

  • 分类:产品说明书
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  • 发布时间:2021-12-16 10:22
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抗体偶联药物(ADC)纯化选择

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抗体偶联药物(ADC)纯化选择

抗体药物偶联物(ADC)是通过偶联臂将抗体和小分子药物相结合,可杀死或抑制癌细胞等特定细胞的抗体药物。到202110月为止,除了美国FDA已经批准上市的12个品种以外,还有3种具有类似结构的免疫毒素偶联物(重组)也获得了批准。随着研发的不断推进,目前还有约150ADC药物正处于临床试验阶段。

ADC的纯化工艺中常用到的分离方法,一种是在抗体上结合药物之后,通过疏水层析(HIC)分离出结合小分子药物数量不同的ADC;另一种是通过尺寸排阻层析(SEC)根据分子尺寸的差异,分离ADC的多聚体和未反应试剂。

利用疏水填料进行纯化示例

HIC column (0.8 *10 cm, 5 mL) ToyoPearl Phenyl-650S HIC resin (Tosoh Bioscience)

buffer A 50 mM sodium phosphate pH 7.0, 2 M sodium chloride (NaCl)

buffer B 50 mM sodium phosphate pH 7.0, 20% isopropyl alcohol (IPA) v/v).

loading25mg/ml sample  25ml+25ml buffer A

Linear gradient100% buffer A to 100% buffer B

利用ToyoPearl Phenyl-650S能够有效去除DAR=0杂质,DAR=0在该款填料上不保留很好的流穿,DRA=1和DAR=2保留,梯度洗脱能够进行很好的分离,并且产品回收率也能够达到65%。

如需了解更多详情请参考一下文献:

  1. Y. Matsuda et al., A purification strategy utilizing hydrophobic interaction chromatography to obtain homogeneous species from a site-specific antibody drug conjugate produced by AJICAP™first generation antibodies, 2020, 9, 16,
  2. S. J. Walsh et al., Site-selective modification strategies in antibody-drug conjugates, Chem. Soc. Rev., 2021, 50, 1305
  3. Q. Dean et al., Targeting cancer with antibody-drug conjugates; Promises and challenges, MAbs. 2021; 13(1): 1951427,
  4. J. T. W. Tong et al., An insight into FDA approved antibody-drug conjugates for cancer therapy, Molecules, 2021, 26, 5847,

 

 

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