使用TSKgel UP-SW3000进行单克隆抗体分析


发布时间:

2022-10-20 11:15

使用TSKgel UP-SW3000进行单克隆抗体分析

近年来,抗体药物市场在逐步扩大,未来的几年仍将持续发展。越来越多的抗体药物将会应用到疾病的治疗中。尺寸排阻色谱法(SEC)广泛用于抗体中单体,二聚体,聚集体和片段等的分析和定量中。为实现更高的分离度和更快的分析时间,色谱柱生产厂家优化了填料颗粒化学和色谱柱填充方法,近年来,2μm和亚2μm粒径SEC色谱柱相继问世.

通过这种方法使得一些样品的分析结果得到了改善,但由于一些新型抗体药物具有高度的疏水性,抗体在色谱柱凝胶基质上的非特异性吸附使得抗体药物的分析仍然具有一定的挑战。在本应用指南中,使用TSKgel®UP-SW30002μm SEC色谱柱分析单克隆抗体(mAb),并在pH 6.7的磷酸钠缓冲液中添加15IPA。如图所示,峰分离度和保留时间变化均不受影响。

 

HPLC实验条件

色谱柱:TSKgel UP-SW30002μm4.6 mm ID x 30 cm

  器:Chromeleon®7.2版)运行的UltiMate®3000 UHPLC系统

流动相:100 mmol / L KH2PO4 / Na2HPO4中的15IPApH 6.7100 mmol / L Na2SO40.05NaN3

  速:0.30 mL / min

  测:紫外线@ 280 nm

  度:30˚C

  力:22 MPa(最大色谱柱压力为34 MPa

进样量:5μL4 mg / mL

  品:USP mAb标准品

 

结果与讨论

USP mAb标准品注射到TSKgel UP-SW3000 4.6 mm ID×30 cm色谱柱上,利用磷酸钠缓冲液pH 6.7为流动相,样品具有出色的重现性,如图1所示。该图显示了以0.3 mL / min的流速连续进样14USP mAb标准样品,单体,二聚体,聚集体和碎片峰的保留时间几乎不变,每次进样的峰宽和峰形非常一致。

 

 

TOSOH、,UP-SW3000,色谱柱

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