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编号 :

1032597095761928192

rLys-C蛋白酶, 质谱级


质谱级rGlu-C蛋白酶特异性水解在谷氨酸或天冬氨酸片段的C端的肽键。该酶适合在溶液中进行消化反应,不推荐用于胶内消化。
在碳酸氢铵和醋酸铵缓冲液中,对谷氨酸残基的切割特异性更高;在磷酸盐缓冲液中,谷氨酸和天冬氨酸残基均可被切割。

所属分类:

华利世蛋白酶

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  • 产品描述
    • 商品名称: rLys-C蛋白酶, 质谱级
    • 商品编号: 1032597095761928192

    质谱级rGlu-C蛋白酶特异性水解在谷氨酸或天冬氨酸片段的C端的肽键。该酶适合在溶液中进行消化反应,不推荐用于胶内消化。<br/> 在碳酸氢铵和醋酸铵缓冲液中,对谷氨酸残基的切割特异性更高;在磷酸盐缓冲液中,谷氨酸和天冬氨酸残基均可被切割。<br/>

    产品信息|Certificate of Analysiss

    rLys-C蛋白酶, 质谱级

    订货号

    产品名称

    包装

    HLS LYS001C

    20µg

    HLS HAc001

    rLys-C 蛋白酶

    500µl

    说明: 质谱级rLys-蛋白酶特异性水解在赖氨酸片段的C端的肽键。可用于提高对不易水解的蛋白质的消化; 推荐在6-8M尿素溶液中进行

    物理形态: 质谱级rLys-C蛋白酶是冻干粉,含0.5mg海藻糖/瓶

    分子量:27kDa.

    溶解液(HLS HAc001C):rLys-C蛋白酶复溶解缓冲液建议1mM盐酸或50mM醋酸

    储存条件:冻干粉末存储在-20℃冰箱,再溶解的酶储存在-20℃。有效期见产品标签

    保质期:12月在-20℃

    pH 值范围: 在8-9 时,rLys-C 具有很好的活性

    适用范围:rLys-蛋白酶特异性水解变性后比较不易酶切的蛋白质K位,推荐和Trypsin混合使用。

    混合酶推荐SOP:

    A. 通用溶液酶解法

    100ug Trypsin/20ug rLys-C 混合酶按照 25:1 蛋白和蛋白酶的量(w/w)使用, 37°C恒温过夜13-16小时.

    温馨提示:尿素的浓度最好小于1M, 50mM Tris-HCl 缓冲溶液(pH 8)

    B. 1+1步溶液酶解法

    1. 100ug Trypsin/20ug rLys-C 混合酶按照25:1 蛋白和蛋白酶的量(w/w)使用, 37°C.恒温酶解2-4小时.

    温馨提示:尿素的浓度为6-8M, 50mM Tris-HCl 缓冲溶液(pH 8)

    2. 稀释上一步的溶液6倍,37°C恒温过夜13-16小时

    温馨提示:尿素的浓度最好小于1M, 50mM Tris-HCl 缓冲溶液(pH 8)

    质量控制|Quality Control

    纯度: 液相色谱280nm检测杂质蛋白质峰强度,rLys-C峰强度大于99.9%

    专一性:E.coli大肠杆菌样品,ESI-MS/MS质谱分析K端的专一性大于99.5%

    活性:25unit/min/mg; 单位定义:rLys-c白蛋酶每分钟酶切1.0 umole T-G-P Lys Nitroanilide的量,反应条件:25℃,波长405nm

    Maldi TOF质谱检测: 纯化后的蛋白酶使用HCCA基质激光解析质谱分析未见杂质蛋白质峰

    LC-MS/MS 质谱分析: 使用rLys-c酶解HSA(人血清白蛋白,纯度99.9%)实验,DTT还原,IAA保护,PH8.0, 37°C恒温过夜16小时,液质Q-E联

    用仪 分析,覆盖率87%

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