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三菱化学配位交换手性色谱柱

1、Ultron ES-OVM
Ultron ES-OVM,粒径是5um,孔径120À,手性固定相为卵粘蛋白(手性固定相专利号US:6027648),卵粘蛋白通过化学键合在硅胶的表面,符合USP L57。ULtron ES-OVM柱填料有很多的手性识别位点,使得该柱子适用于大范围内的对映体化合物的分离,可用于痕量分析,是硫酸氢氯吡格雷的专用手性柱,可用水做流动相。在国家药品标准中规定,ES-OVM色谱柱作为苯磺酸左旋氨氯地平光学异构体测定的专用柱。还可用于分析混合药物、杀虫剂以及其它有机化合物。
1)PH影响
图1中显示了流动相pH和溶质容量因子k'之间的一种特定联系。碱性化合物的k'将会随着pH值升高增加,而酸性化合物的k'将会随着pH值升高而减少。当pH低于3.9的时候,酸性化合物也会减少保留时间,此点是卵沾类蛋白等电点。碱性化合物的分辨率随pH增加而增加。对于酸性化合物,分辨率随pH的减少而增加。
图1
2)盐浓度
图2显示了流动相中盐浓度对峰值保留的影响。由图可见,在高于20mM时没有影响。当使用盐浓度低时(例如,5mM),酸性化合物的k'经常是增加的,然而碱性化合物的k'有轻微的减少。
图2
3)有机溶剂
Ultron ES-OVM柱可以采用缓冲流动相,pH范围在2~7.5(最好是3~7)。可以使用常见的有机水混融溶剂,如乙腈、甲醇、乙醇和丙醇。建议有机溶剂流动相不能>50%,最好在30-40%。改变流动相中有机溶剂(甲醇、乙醇或乙腈)的种类,会改变样品化合物的保留时间。改变流动相中有机溶剂的组成也会使样品化合物的保留时间发生改变。这种影响和传统的反相HPLC类似,见图3。
图3
4)柱子温度
柱温和峰保留时间之间的关联是复杂的。柱效随着温度升高而增加,但操作温度不超过40℃。
5)样品载量
柱效随着注射样品质量的增加而降低。因此,建议每次上样品量少于5ug。推荐样品浓度<0.05mg/ml,进样量10μl。
6)Ultron ES-OVM柱应用
Ultron ES-OVM柱可以分离很多种类的手性异构体,包括药物方面,如β阻断剂烯丙心安和布尼洛尔、抗组织胺(氯曲米通)、非甾体抗炎药(布洛芬)。其它应用包括农用化学品、外消旋胺以及酸性化合物。
7)使用注意事项:
为了保护分析柱不受污染,建议使用保护柱。样品中含有的具有很高保留的外来物质应尽量避免。柱子污染后,会产生很差的峰形,可采用20-40柱体积的50%的乙腈/蒸馏水进行冲洗恢复。当长时间不使用时,需要冲洗掉之前用过的缓冲物质,柱子最好保存在异丙醇/水=1/2中。操作压力建议是200bar (3000psi)。
8)Ultron ES-OVM柱规格型号:
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参数

三菱化学配位交换手性色谱柱

1、MCI GEL CRS10W和CRS15W

MCI GEL CRS10W和MCI GEL CRS15W色谱柱,固定相是粒径为3μm、孔径为100Å的硅胶表面键合新型光学活性体N,N-Dioctyl-L(D)-alanime,流动相为硫酸铜水溶液。CRS10W色谱柱中, D构型化合物先于L构型被洗脱出来,但是在CRS15W色谱柱中,L构型化合物先于D构型化合物被洗脱出来。MCI GEL CRS10W和MCI GEL CRS15W色谱柱不但能分离α-氨基酸,也能分离α-羟基羧酸。

绿百草科技

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注意事项:

1、配体固定相和铜离子流动相之间达到平衡需要几个小时。在进样之前或者改变硫酸铜洗脱液的浓度时,建议平衡柱子2-3小时。

2、对于酸性氨基酸,高浓度的硫酸铜洗脱液可以得到更好的分离效果。

3、对弱保留的亲水性氨基酸,降低流速(0.2-0.5ml/min)可增加保留。

4、当样品溶液中氨基酸的浓度高于流动相中硫酸铜的浓度时,连续进样可能会降低峰面积。

5、注意不要同时使用水溶性有机溶剂(乙腈、甲醇等)和非水溶性有机溶剂(正己烷、氯仿等)做流动相,这会对柱子造成不可修复的损伤。要特别注意该柱正反相模式不可更换。

6、不要使用酸或碱溶液调节流动相的pH值。不要使用缓冲液,因为缓冲液会形成沉淀,堵塞柱子。

7、对于强保留的亲水性氨基酸,流动相中添加乙腈或者甲醇可以快速洗脱。有机溶剂的浓度要低于15v/v%。

8、DOPA和其它非极性氨基酸会吸附到柱填料上,污染柱子。

9、污染后的柱子再生很困难。

2、MCI GEL CK08E系列

CK08E系列是阳离子交换色谱柱,可用于分离糖类、羧酸、聚醇。

柱型号

离子类型

应用

MCI GEL CK08S
MCI GEL CK08E

Na+

一般的糖分离柱

MCI GEL CK08EC

Ca2+

最普通的糖分离柱,推荐果糖和葡萄糖

MCI GEL CK08ES

Ag+

凝胶渗透色谱

MCI GEL CK08EH

H+

有机酸用磷酸盐缓冲液,糖类用蒸馏水

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