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MonoSelect RP-mAb单克隆抗体专用柱

MonoSelect RP-mAb单克隆抗体专用柱抗体是指机体由于抗原的刺激而产生的具有保护作用的蛋白质。它是一种由浆细胞分泌,被免疫系统用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等的大型Y形蛋白质。
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产品编号
所属分类
专用色谱柱
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GL、MonoSelect RP-mAb单克隆抗体专用柱
色谱柱
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产品描述
参数

MonoSelect RP-mAb单克隆抗体专用柱

抗体是指机体由于抗原的刺激而产生的具有保护作用的蛋白质。它是一种由浆细胞分泌,被免疫系统用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等的大型Y形蛋白质。抗体药物中使用到的单克隆抗体(IgG)在生产工艺(细胞培养、分离纯化)与保存过程中易发生不均一性的变化,这些不均一性会使药物的药效、安全性方面受到影响。
  而随着生产工艺及分析手段的进步,单克隆抗体类药物的质量控制将更加严格。高效液相色谱(HPLC)作为一种分离技术,在蛋白质、抗体等生物大分子的分离分析方面已得到越来越广泛的应用。但是,目前市面上的方法分析单克隆抗体存在着响应不高,峰型不好或者理论塔板数不佳的情况。而GL Sciences新上市的MonoSelect RP-mAb单克隆抗体专用柱可以有效解决此类问题。

  • 基本参数:

基体:高纯度整体化硅胶
贯通孔尺寸:1 μm
中孔尺寸:60 nm
表面积:50 m2/g
化学键基团:苯基
含碳量:2 %
内径:2.1 mm
长度:20 mm
色谱柱类型:柱套式
推荐工作温度:80 ℃
推荐工作压力:40 MPa
推荐工作pH范围:27.5

  • 何谓整体化硅胶柱


  • 特点

多检体快速分析
通过利用硅胶整体柱的低压特性,MonoSelect RP-mAb可以在高流速下快速分析。

 

实现低浓度下高灵敏度分析

在蛋白质分析中,尤其是在低浓度分析中,峰形可能会变形。

MonoSelect RP-mAb硅胶整体孔的介孔设计为60 nm,适合mAb分析,表面经过惰性化处理,低浓度分析下也能得到尖锐的峰形


 

提升高温测定时色谱柱的耐久性

为防止高分子量蛋白质分析出现拖尾现象,需要在高温(约80°C)下进行测量。即使在存在TFA的流动相条件下,MonoSelect RP-mAb80°C时仍具有出色的耐久性。

Column:  MonoSelect-RP mAb
Eluent:  A
H2O (0.1 %TFA)       BMeCN(0.1 %TFA)
Gradient:  A/B = 90/10-(10 min)-10/90-(0.1 min)-90/10-(20 min)-90/10
Flow Rate:  0.3 mL/min 
Oven Temp.:  80 ℃
Injection Vol.
5 μL

 

应用实例
1. 还原处理前后的辅助因子分析
MonoSelect RP-mAb不仅可以用于分析还原前的抗体,还可以用于分析辅助因子。



2. 木瓜蛋白酶处理的抗体消化物分析
木瓜蛋白酶是在活性位点具有巯基的非特异性硫醇内肽酶。在还原剂的存在下,IgG分子在一个或多个铰链区中切割肽键,从而产生两个Fab片段和一个Fc片段。
通过使用Monoselect RP-mAb,您可以监控木瓜蛋白酶对mAb的消化状态。


3. ADC(抗体药物偶联物)分析案例研究
分析条件
Eluate:
A) 0.075 % FA + 0.025 % TFA in H2O 
B) 0.075 % FA+0.025 % TFA in ACN  A/B = 80/20-(5min)-40/60
Flow rate: 0.3 mL/min 
Oven Temp.: 80 ℃ 
Detection: 214 nm 
Injection Vol.: 1 mL
Sample: SigmaMAb Antibody Drug Conjugate (ADC) Mimic (1 mg/mL)  (Antibody Cysteine-Fluorophore Conjugate Standard)





通过使用MonoSelect RP-mAb,可以知道ADC的药物-抗体比率(知道在哪个二硫键位置通过连接器将药物导入的分布量)。

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