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出口食品中天然甜味剂甜菊糖苷、甜菊双糖苷、甘草酸、甘草次酸的测定

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  • 发布时间:2020-05-22 00:00
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出口食品中天然甜味剂甜菊糖苷、甜菊双糖苷、甘草酸、甘草次酸的测定

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  甜菊糖苷、甜菊双糖苷(瑞鲍迪甙A)、甘草酸、甘草次酸

  Stevia sugar、Rebaudioside A、Glycyrrhizic acid、glycyrrhetnic acid

  【基本信息】

  甜菊糖苷:甜菊糖(Stevioside)又称甜菊苷,它是从菊科植物(Stevia Rebaudia)该植物在我国称作甜叶菊)的叶子中提取出来的一种糖苷。甜叶菊原产于巴拉圭和巴西,现在中国、新加坡、马来西亚等国家也有种植,其甜味成分由甜菊苷及甜菊A苷、B苷、C苷、D苷和E苷组成。甜菊苷可用水从干叶子中提取、澄清和结晶,实际生产中获得了3种类型,分别是粗提物和纯度为50%及90%的产品。

  甘草酸:.可用作甜味剂、调味剂、香味增强剂。我国民间惯用于酱及酱制品、腌渍品等。由于具有各种生理活性,具有养发育发的显著效果,可作为头发营养制品及护肤制品的添加剂。在护肤用品中使用可增强其他活性物在防晒、增白、止痒、调理、愈疤方面的疗效。

  甘草次酸:甘草(Glycyrrhize glabra L.)是常见的药食两用食品·甘草提取物作为天然的甜味剂广泛用于糖果和罐头食品。甘草的甜味来自甘草酸(Glycyrrhizic acid)和甘草次酸(Glycyrrhetinic acid)。前者是一类三萜类皂苷,约占甘草根干重的4%~5%,甜度为蔗糖的50倍·甘草次酸是由甘草酸水解脱去糖酸链而形成,甜度为蔗糖的250倍。甘草次酸具有细胞毒性,长时间大量食用甘草糖(100g/d)可导致严重的高血压和心脏肥大,临床症状表现为钠离子贮留和钾离子的排出,严重者可导致极度虚弱和心室纤颤。

  【溶液的配制】

  色谱流动相配制:流动相A:20 mmol/L 磷酸水溶液

  流动相B:乙腈

  流动相C:甲醇

  甜菊糖苷、甜菊双糖苷对照溶液配制:各称取1 mg,用1 mL甲醇溶解,取出少量并稀释至20μg/mL。

  甘草酸、甘草次酸对照溶液配制:各称取0.5 mg,用1 mL甲醇溶解,取出少量并稀释至10 μg/mL。

  【分析条件】

  仪器: Thermo Ultimate 3000

  色谱柱:TSKgel ODS-100V(4.6 mm I.D.×15 cm,5μm)

  色谱流动相:流动相A:20 mmol/L 磷酸水溶液

  流动相B:乙腈

  流动相C:甲醇

  洗脱梯度:

时间/min

流动相A/%

流动相B/%

流动相C/%

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60

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3

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50

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50

10

20

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80

25

10

0

90

28

63

34

3

35

63

34

3

  流速: 1.0 mL/min

  柱温: 30℃

  进样量:10 μL

  检测器:紫外检测器,210 nm&254nm

  【分析结果】

绿百草科技

  图1 甜菊糖苷、甜菊双糖苷色谱图210nm(1 mg/mL)

峰序号

对照品名称

保留时间(min)

不对称因子

分离度

理论塔板数

1

甜菊糖苷

3.752

-

-

7902

2

甜菊双糖苷

3.983

0.92

1.41

9799

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  图2 甜菊糖苷、甜菊双糖苷色谱图210nm(20 μg/mL)

峰序号

对照品名称

保留时间(min)

不对称因子

分离度

理论塔板数

1

甜菊糖苷

3.722

-

-

8676

2

甜菊双糖苷

3.955

-

1.45

9557

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  图3 甘草酸、甘草次酸色谱图254nm(0.5 mg/mL)

峰序号

对照品名称

保留时间(min)

不对称因子

分离度

理论塔板数

1

甘草酸

13.017

1.05

-

134529

2

甘草次酸

21.175

1.06

34.84

67364

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  图4 甘草酸、甘草次酸色谱图254nm(10 μg/mL)

峰序号

对照品名称

保留时间(min)

不对称因子

分离度

理论塔板数

1

甘草酸

13.012

1.05

-

133193

2

甘草次酸

21.177

1.01

35.32

70160

  结论:TSKgel ODS-100V(4.6 mm I.D.×15 cm,5μm)可以将甜菊糖苷、甜菊双糖苷、甘草酸、甘草次酸分离出来,且甜菊糖苷与甜菊双糖苷的分离度优于检疫标准中所附图谱(见下图附件),且对于标准中所提及的检出限也可以满足,符合出入境检疫标准SN/T3854-2014中的要求。

  附件:

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