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采用TSKgel G5000PWXL 分离重组SARS-CoV-2 S蛋白

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  • 发布时间:2020-05-22 00:00
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采用TSKgel G5000PWXL 分离重组SARS-CoV-2 S蛋白

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  *重组SARS-CoV-2 S蛋白(Recombinant SARS-CoV-2 S proteins)

  【基本信息】

  SARS-CoV-2属于冠状病毒科、β冠状病毒属,是一种球形、有包膜的单正链RNA病毒。主要编码4种结构蛋白:刺突糖蛋白(spike glycoprotein,S蛋白)、包膜蛋白(envelope protein,E蛋白)、膜蛋白(membrane protein,M蛋白)、核衣壳蛋白(nucleocapsid protein,N蛋白)。S蛋白是新型冠状病毒最重要的表面蛋白,是中和病毒感染抗体的主要靶点,也是疫苗设计的核心免疫原成分。S蛋白由S1和S2亚基组成,其中白受体结合域(RBD)位于S1亚基。这里对昆虫细胞中表达并纯化得到的了重组SARS-CoV-2 S蛋白及片段S1蛋白和RBD蛋白进行了高效尺寸排阻色谱(HPSEC)的分离和表征。

  【样品制备】

  重组SARS-CoV-2 S 蛋白及片段S1蛋白、RBD蛋白参考方法[1]制备。

  【分析条件】

  色谱柱:TSKgel G5000PWXL(I.D.7.8 mm×30 cm,10 μm)

  流动相:10 mM PB(pH 7.4)

  流速:0.5 mL/min

  柱温:室温

  检测器参数:UV @280 nm

  样品:重组S蛋白及S1蛋白、RBD蛋白

绿百草科技

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  图1纯化后重组S蛋白及S1蛋白、RBD蛋白分离色谱图

  【结果与讨论】

  采用高效凝胶色谱TSKgel G5000PWXL对纯化后重组SARS-CoV-2 S 蛋白及片段RBD、S1溶液进行了分离。实验结果表明:该色谱柱可有效实现纯化后重组SARS-CoV-2 S蛋白、S1蛋白及RBD蛋白的分离。RBD、S1和S在洗脱体积分别为9.0 mL、5.5 mL和5.3 mL的HPSEC谱图上均显示一个主峰(见图1)。

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